پپتیدهای بیوتین

پپتیدهای بیوتینیله چیست؟

پپتیدهای بیوتینیله پپتیدهایی هستند که اصلاح شده اند تا بخش بیوتین را شامل شوند. این اصلاح از برهمکنش{1} میل ترکیبی بالا بین بیوتین و آویدین یا استرپتاویدین بهره می برد که به طور گسترده در کاربردهای بیولوژیکی و بیوشیمیایی استفاده می شود. مولکول بیوتین کوچک، پایدار است و ساختار یا عملکرد پپتید را به طور قابل توجهی تغییر نمی دهد، در حالی که امکان جذب یا تشخیص بسیار کارآمد را از طریق سیستم های مبتنی بر آویدین فراهم می کند.

 

اصلاح شیمیایی
بیوتین معمولاً از طریق یک معرف NHS-بیوتین (N-هیدروکسی سوکسینیمید بیوتین) وارد می‌شود، که با گروه‌های آمین اولیه موجود در انتهای N یا باقی مانده‌های لیزین پپتید واکنش نشان می‌دهد و یک پیوند آمیدی پایدار تشکیل می‌دهد.

生物素 (بیوتین) 肽 (پپتید)

COOH NH2

| |

+---EDC/NHS---→ 活化羧基（فعال‌سازی） → 缩合（Coupling）

↓ ↓

بیوتین-CONH-پپتید

 

تعامل قرابت
پپتید بیوتینیله می تواند به شدت (Kd ~ 10-15 M) به آویدین یا استرپتاویدین متصل شود، و آن را برای استفاده در سنجش هایی که نیاز به تشخیص دقیق، ضبط یا بی حرکتی دارند، ایده آل می کند.

موارد سنتز پپتید بیوتینیله

توالی پپتیدی: بیوتین-Ahx-YXXXXXRXRRR-NH2

طول: 11 آمپر

Purity: >95%

M.W: 1898.32

توالی پپتیدی: بیوتین-YXXXXXRXRRR--ERXXXDLXXXXPVXXXXPRR

طول: 31A

Purity: >95%

M.W: 4145.89

 

کاربردهای پپتیدهای بیوتینیله شده

پپتیدهای بیوتینیله ابزارهای همه کاره در تحقیقات و صنعت هستند، با طیف وسیعی از کاربردها، از جمله:

تصفیه میل جنسی

برای خالص سازی شرکای اتصال مانند پروتئین ها، آنتی بادی ها یا اسیدهای نوکلئیک با تثبیت پپتید بیوتینیله روی دانه های استرپتاویدین استفاده می شود.

الایزا و وسترن بلاتینگ

پپتیدهای بیوتینیله شده هنگامی که با برچسب های فلورسنت آویدین-HRP یا آویدین- جفت می شوند، به عنوان پروب برای تشخیص فعل و انفعالات خاص عمل می کنند.

تشدید پلاسمون سطحی (SPR)

برای تثبیت پپتیدها بر روی تراشه های حسگر زیستی برای مطالعات برهمکنش استفاده می شود.

کشف دارو

غربالگری نامزدهای دارویی با تجزیه و تحلیل اتصال آنها به اهداف پپتیدی بیوتینیله

ایمونولوژی

پپتیدهای بیوتینیله شده برای نقشه برداری اپی توپ ها، مطالعه برهمکنش های آنتی ژن{0}}آنتی بادی، و انجام سنجش های سلولی T استفاده می شوند.

نقشه برداری اپی توپ برای توسعه واکسن

یک پپتید بیوتینیله سفارشی برای شناسایی اپی توپ های آنتی ژنیک یک پروتئین ویروسی استفاده شد که به طراحی یک نامزد واکسن کمک کرد.

پروتئین-مطالعات تعامل پروتئین

پپتیدهای بیوتینیله تثبیت شده بر روی صفحات پوشش داده شده استرپتاویدین، مطالعه برهمکنش‌های گیرنده{1}}لیگان را امکان‌پذیر می‌سازد و شباهت‌های پیوندی حیاتی برای توسعه دارو را آشکار می‌کند.

بهینه سازی ایمونواسی

در یک روش تشخیصی، پپتیدهای بیوتینیله شده به عنوان آنتی ژن برای بهبود حساسیت و ویژگی ELISA برای تشخیص نشانگرهای زیستی بیماری استفاده شدند.

 

مراجع

1. گرین، NM (1975).آویدین و استرپتاویدین.مجله بیوشیمی، 131 (3)، 781-791.

2. Chaiet، L.، و Wolf، FJ (1964).خواص استرپتاویدین، یک پروتئین اتصال{0}بیوتین تولید شده توسط استرپتومایسس.آرشیو بیوشیمی و بیوفیزیک، 106(1)، 1-5.

3. Finn, FM, & Titus, G. (1994).بیوتینیلاسیون پروتئین ها در تحقیقات و بیوتکنولوژیمقعد بیوشیمی، 218 (1)، 1-7.