+86-0755 2308 4243
  • تلفن

    +86-0755 2308 4243

  • آدرس

    اتاق 309، ساختمان میهوا، پارک صنعتی تایوان، خیابان سونگ بای شماره 2132، منطقه بائوآن، شنژن، چین

  • ایمیل

    sales@biorunstar.com

سوالات متداول

 

 

Biorunstar از چه روش‌های سنتز برای سنتز پپتید استفاده می‌کند؟

RE: Biorunstar روش‌های مختلف سنتز فاز راه‌حل را برای برآوردن نیازهای مشتریان توسعه داده است. معمولاً از شیمی فاز جامد Fmoc استفاده می شود.

چگونه پپتیدها را حمل می کنید؟ چه داده های QC ارائه خواهد شد؟

RE: همه پپتیدها توسط DHL یا FedEx express مانند پودر لیوفیلیزه در ویال های جداگانه با برچسب خوب در دمای اتاق ارسال می شوند. به استثنای پپتیدهای خام، که فقط با طیف سنجی MALDI-MASS بررسی می شوند، همه پپتیدهای مصنوعی خالص شده با گزارش پروژه (CoA)، داده های MS و داده های HPLC ارائه می شوند. برگه های داده ای ارائه خواهد شد که حاوی ویژگی های کلیدی، مانند توالی پپتید، خلوص، کمیت، اصلاح، داده های طیف جرمی و داده های HPLC باشد.

زمان معمول برای سنتز پپتید چقدر است؟ چقدر طول می کشد تا برای من ارسال شود؟

RE: زمان معمول ما برای یک پپتید استاندارد زیر 30 اسید آمینه 2-3 هفته است. زمان چرخش بسته به طول پپتید، کمیت، حلالیت و دشواری متفاوت است. معمولاً 3-5 روز برای دستیابی به محققان در کشورهای دیگر.

چه مدت می توانید سنتز کنید؟

RE: Biorunstar تجربه گسترده ای در سنتز پپتیدهای طولانی، تا 130aa دارد. برخلاف بسیاری از تامین کنندگان پپتید که فقط در ساخت پپتیدهای زیر 30 یا 40aa راحت هستند، Biorunstar تجربه خوبی در ساخت پپتیدهایی از 40aa تا 90aa دارد. سنتز پپتیدهای طولانی، به خصوص 100aa یا بیشتر دشوار است. اگر قصد دارید دنباله ای از 130aa یا بیشتر را سنتز کنید، لطفاً برای بیان پروتئین سفارشی و خدمات خالص سازی با ما تماس بگیرید.

اگر مشکلاتی در طول فرآیند سنتز یا تصفیه ایجاد شود چه؟

RE: هر پپتید ویژگی های خاص خود را دارد. اگر در طول سنتز مشکلاتی فراتر از انتظار ما رخ دهد و نتوانیم پپتید شما را به موقع تحویل دهیم، در اسرع وقت به شما اطلاع خواهیم داد. اگر ما قادر به ساخت پپتید نباشیم، هیچ هزینه ای از شما دریافت نمی شود.

فرم نمک TFA، فرم نمک استات یا HCl: کدام فرم را باید انتخاب کنم؟

به طور پیش فرض، پپتیدها در نمک TFA سنتز می شوند. برای آزمایش‌های مربوط به کشت سلولی یا بافتی، باید پپتیدهایی را در نظر بگیرید که به شکل استات یا نمک HCl 98 درصد یا بالاتر تولید می‌شوند تا از پاسخ‌های غیرطبیعی جلوگیری کنید. فرم نمک استات یا HCl را می توان با هزینه اضافی درخواست کرد.

عمر مفید یک پپتید چقدر است؟

RE: اگر پپتیدها به صورت لیوفیلیزه در فریزر نگهداری شوند حداقل یک سال پایدار هستند. اگر پپتیدها حل شوند، ممکن است عمر ماندگاری کاهش یابد. اگر پپتیدها حاوی چندین اسید آمینه فعال باشند که می توانند اکسید شوند مانند Trp، Met اما به ویژه Cys، عمر مفید نیز ممکن است کاهش یابد.

این پپتید حاوی چندین سیستئین است و بنابراین به راحتی می تواند پیوندهای دی سولفیدی ایجاد کند. چگونه از این امر اجتناب کنم؟

RE: اگر توالی پپتیدی حاوی چندین سیستئین یا سایر اسیدهای آمینه فعال باشد که به راحتی اکسید می شوند، Biorunstar پیشنهاد می کند پپتید را با ردپایی از احیا کننده قوی DTT تحویل دهد. پپتید تنها در صورتی با DTT تحویل داده می شود که این امر به طور خاص توسط مشتری مجاز باشد.

چگونه پپتیدهای مصنوعی خود را ذخیره کنم؟

RE: بیشتر پپتیدهای لیوفیلیزه شده در دمای اتاق به مدت 2-3 هفته پایدار خواهند بود. برای نگهداری طولانی مدت، باید پپتیدهای لیوفیلیزه را در -20 درجه ذخیره کنید. از تکرار چرخه های انجماد و ذوب باید اجتناب شود. قبل از باز کردن اجازه دهید به دمای اتاق برسد. عمر مفید محلول های پپتید محدود است. یک محلول پپتیدی پس از تهیه باید در اسرع وقت استفاده شود.

خلوص پپتید خام و پپتید نمک زدایی چیست؟ چگونه پپتید را تصفیه می کنید؟ ناخالصی ها چیست؟

RE: برای پپتیدهای کوتاه با توالی نرمال زیر 15aa، معمولاً 40-60% توسط HPLC برای درجه خام است. 50-70% توسط HPLC برای درجه نمک زدایی. هر چه پپتید طولانی تر باشد، خلوص خام یا نمک زدایی کمتر است. پپتیدها به طور کلی توسط HPLC با استفاده از آب و گرادیان استونیتریل خالص می شوند. بیشتر ناخالصی ها قطعات یا پپتیدهای حذف، پپتیدهای کاملاً محافظت نشده و نمک و آب باقی مانده هستند.

توضیح خلوص پپتید توسط HPLC، محتوای پپتید کل و محتوای پپتید هدف.

RE: Biorunstar پپتیدها را بر اساس وزن ناخالص پودر لیوفیلیزه ارسال می کند. پودر لیوفیلیزه شامل ناخالصی هایی مانند قطعات یا پپتیدهای حذف، پپتیدهای کاملاً محافظت نشده، TFA و آب باقیمانده است. خلوص پپتید توسط HPLC اندازه گیری می شود. این مقدار پپتید صحیح نسبت به تمام آنالیت‌هایی است که در 214 نانومتر جذب می‌شوند (پیوند پپتیدی جذب می‌شود)، به احتمال زیاد حذف، برش یا توالی‌های کاملاً محافظت نشده، و غیره. خلوص پپتید توسط HPLC آب و نمک را در نظر نمی‌گیرد. که معمولا در نمونه وجود دارد. محتوای پپتید کل درصد کل پپتیدهای موجود نسبت به هر چیزی است که در پودر پپتید لیوفیل شده وجود دارد. محتوای کل پپتید با تجزیه و تحلیل محتوای نیتروژن تعیین می شود. بنابراین، محتوای پپتید هدف در پودر پپتید لیوفیلیزه را می توان با فرمول نتیجه گرفت: محتوای پپتید کل X خلوص پپتید توسط HPLC.

روش برچسب گذاری فلورسین چیست؟

RE: FITC (فلورسئین ایزوتیوسیانات) پیش ساز فعال شده ای است که برای برچسب زدن فلورسین استفاده می شود. برای برچسب زدن Nterminal کارآمد، یک آمینو هگزانویل هفت اتمی
فاصله بین (NH2-CH2-CH2-CH2-CH{4}}CH2-COOH) بین فلوروفور (فلوروسئین) و انتهای N پپتید. این اسپیسر به جدا کردن فلوروفور از نقطه اتصالش کمک می‌کند و به طور بالقوه برهمکنش فلوروفور را با بیومولکولی که به آن کونژوگه شده کاهش می‌دهد و آن را برای معرف‌های تشخیص ثانویه قابل دسترس‌تر می‌کند.

آیا برچسب گذاری C ترمینال بیوتین (یا FITC) امکان پذیر است؟

RE: بله. برچسب‌گذاری C ترمینال بیوتین (یا FITC) با افزودن یک باقیمانده لیزین در انتهای C یک پپتید انجام می‌شود و بیوتین (یا FITC) از طریق یک پیوند آمیدی به زنجیره جانبی لیزین متصل می‌شود. بار مثبت لیزین حذف می شود.

طول پپتید مناسب برای تولید آنتی بادی چقدر است؟

RE: به طور کلی، یک پپتید باقی مانده 10-25 توصیه می شود. یک پپتید طولانی‌تر می‌تواند اپی توپ‌های بیشتری داشته باشد، اما همچنین می‌تواند شانس بیشتری برای تشکیل ساختارهای ثانویه پایدار داشته باشد که فرم‌های بومی نیستند. یک پپتید کوتاهتر (<10aa) is generally not good unless there are valid reasons for it, such as potential sequence homology with a related family member or other proteins.

مپ چیست؟

RE: MAPS یا Multi-Antigenic Peptide یک پپتید منشعب است که در آن زنجیره های پپتیدی خطی در انتهای C خود از طریق هسته پلی لیزین به هم متصل می شوند و در نتیجه اندازه کل مولکول افزایش می یابد. این کار برای از بین بردن جفت شدن پپتیدها به KLH انجام می شود. به نظر می رسد، با این حال، ترکیب پپتیدها روی MAP انعطاف پذیری کمتری دارد و آنتی بادی های به دست آمده توسط MAP معمولاً پروتئین هدف را کمتر از کونژوگاسیون KLH معمولی تشخیص می دهند. علاوه بر این، هیچ پپتید آزاد در هنگام ساخت MAPS تولید نمی شود، که حذف آنتی بادی های هدایت شده با هسته پلی لیزین را دشوار می کند. خالص سازی MAPS توسط HPLC دشوار است و MAPS به دلیل ناهمگنی و اندازه مولکولی بزرگ آن بدون تأیید جرم ارائه می شود.

چرا محلول پپتید کونژوگه با KLH من کدر به نظر می رسد؟

RE: KLH یا Keyhole Limpet Hemocyanin یک پروتئین تجمعی بزرگ است (MW=4x105 – 1x107). به دلیل اندازه و ساختار آن، حلالیت آن در آب محدود است و باعث ایجاد ظاهری کدر می شود. این نباید بر ایمنی زایی تأثیر بگذارد و از محلول کدر می توان برای ایمن سازی استفاده کرد.

آیا می توانید پیک های جرمی M+Na و M+K را در طیف های MALDI توضیح دهید؟

RE: مشاهده ترکیب های افزایشی Na (سدیم) و K (پتاسیم) در طیف MALDI بسیار رایج است. سدیم و پتاسیم از آب استفاده شده در حلال های پپتیدی به دست می آید. حتی آب مقطر و دیونیزه شده دارای مقادیر کمی یون سدیم و پتاسیم است که هرگز نمی توان آنها را به طور کامل حذف کرد. اینها در طی فرآیند مشخصات جرمی MALDI یونیزه می شوند و به گروه های کربوکسیل آزاد پپتید متصل می شوند. از آنجایی که هیچ سیستم تصفیه آب وجود ندارد که تک تک یون های سدیم یا پتاسیم را از آب حذف کند، دیدن ترکیب های افزایشی سدیم و پتاسیم در مواقعی بسیار رایج و اجتناب ناپذیر است. این نشانه خالص نبودن پپتید نیست و همچنین نباید آن را با وزن مولکولی نادرست اشتباه گرفت.