چه معرفهای ترانسفکشن برای TET - 213 مناسب است؟

در زمینه تحقیقات بیولوژیکی ، رده سلولی TET - 213 به عنوان یک مدل مهم برای تحقیقات مختلف تجربی ، به ویژه در مطالعات مربوط به علوم اعصاب و انکولوژی ظاهر شده است. ما به عنوان یک تأمین کننده پیشرو در سلول های TET - 213 ، ما اهمیت انتخاب معرفهای ترانسفکشن مناسب را برای تحویل ژن کارآمد به این سلول ها درک می کنیم. این پست وبلاگ با هدف کشف معرفهای ترانسفکشن مناسب برای TET - 213 و ارائه بینش در مورد مزایا و محدودیت های آنها است.

درک TET - 213 سلول

TET - 213 یک رده سلولی عصبی انسان است که به دلیل توانایی آن در تمایز به سلول های نورون - مانند سلولهای ، معمولاً در تحقیقات استفاده می شود. این سلولها از تومور نوروبلاستوما مشتق شده و بسیاری از خصوصیات سلولهای پیش ساز عصبی را حفظ می کنند. خصوصیات منحصر به فرد آنها باعث می شود آنها برای مطالعه رشد عصبی ، عملکرد و پاتوژنز بیماریهای عصبی ارزشمند باشند. انتقال ژنهای اگزوژن به سلول های TET - 213 می تواند به محققان کمک کند تا عملکرد ژن ، مکانیسم های نظارتی و تأثیر پروتئین های خاص بر فرآیندهای سلولی را درک کنند.

ملاحظات اصلی برای ترانسفکشن در سلول های TET - 213

قبل از انتخاب معرف ترانسفکشن ، باید چندین عامل در نظر گرفته شود. اولا ، راندمان ترانسفکشن بسیار مهم است. ترانسفکشن با بهره وری بالا تضمین می کند که بخش بزرگی از سلولها DNA اگزوژن یا RNA را به دست می آورند ، و این امکان را برای بیان قوی ژن هدف فراهم می کند. ثانیا ، زنده ماندن سلول باید پس از ترانسفکشن حفظ شود. برخی از معرفهای ترانسفکشن می توانند برای سلول ها سمی باشند و منجر به مرگ سلولی یا رفتار غیر طبیعی سلولی شوند. سوم ، نوع اسید نوکلئیک در حال انتقال (DNA ، RNA یا الیگونوکلئوتیدها) و اندازه آن نیز می تواند بر انتخاب معرف ترانسفکشن تأثیر بگذارد.

معرفهای ترانسفکشن مناسب برای سلول های TET - 213

معرفهای ترانسفکشن مبتنی بر لیپید

معرفهای ترانسفکشن مبتنی بر لیپید یکی از متداول ترین انواع عوامل ترانسفکشن است. آنها با تشکیل لیپوزومهایی که اسید نوکلئیک را محاصره می کنند و با غشای سلولی فیوز می کنند ، کار می کنند و به اسید نوکلئیک اجازه می دهند تا وارد سلول شود. لیپوفکتامین 2000 یک معرف ترانسفکشن مبتنی بر لیپیدهای خوب شناخته شده است که به طور گسترده ای برای انتقال سلول های TET - 213 مورد استفاده قرار گرفته است. این کارآیی ترانسفکشن بالا ، سمیت نسبتاً کم را ارائه می دهد و برای انتقال DNA و RNA مناسب است.
مکانیسم لیپوفکتامین 2000 شامل تشکیل لیپوزومهای با بار مثبت است که با اسید نوکلئیک با بار منفی در تعامل هستند تا لیپوپلکس ها را تشکیل دهند. این لیپوپلکس ها سپس توسط سلولها از طریق اندوسیتوز درونی می شوند. پس از داخل سلول ، اسید نوکلئیک آزاد می شود و برای بیان ژن به هسته منتقل می شود.
یکی دیگر از معرفهای مبتنی بر لیپید ، لیپوفکتامین 3000 ، همچنین عملکرد خوبی در انتقال سلول های TET - 213 نشان داده است. این یک نسخه بهبود یافته از لیپوفکتامین 2000 است ، با افزایش بهره وری ترانسفکشن و کاهش سمیت. لیپوفکتامین 3000 از یک فرمولاسیون جدید استفاده می کند که امکان تعامل بهتر با غشای سلولی و تحویل کارآمدتر اسیدهای نوکلئیک را فراهم می کند.

معرفهای ترانسفکشن بر اساس پلیمر

معرفهای ترانسفکشن مبتنی بر پلیمر گزینه دیگری برای انتقال سلول های TET - 213 است. پلی اتیلنیمین (PEI) یک معرف پلیمری است که معمولاً مورد استفاده قرار می گیرد. PEI یک پلیمر کاتیونی است که می تواند اسیدهای نوکلئیک را به ذرات کوچک متراکم کند و جذب آنها را توسط سلول ها تقویت کند. گزارش شده است که به راندمان ترانسفکشن بالا در سلولهای TET - 213 ، به ویژه برای ترانسفکشن DNA دست می یابد. مزیت PEI کم هزینه و سهولت استفاده آن است. با این حال ، می تواند برای سلولها در غلظت های بالا سمی باشد ، بنابراین بهینه سازی دقیق شرایط ترانسفکشن مورد نیاز است.
JETPEI یک معرف ترانسفکشن مبتنی بر پلیمر تجاری است که برای به حداقل رساندن سمیت ضمن حفظ راندمان ترانسفکشن بالا طراحی شده است. این با موفقیت در انتقال سلول های TET - 213 استفاده شده است و تعادل خوبی بین راندمان ترانسفکشن و زنده ماندن سلول ایجاد می کند.

بردارهای ترانسفکشن مبتنی بر ویروسی

بردارهای مبتنی بر ویروسی نیز به طور گسترده ای برای تحویل ژن به سلول های TET - 213 مورد استفاده قرار می گیرند. بردارهای آدنوویروس به دلیل راندمان ترانسفکشن بالا و توانایی آلوده کردن سلولهای تقسیم کننده و غیر تقسیم کننده شناخته شده اند. آنها می توانند مقادیر نسبتاً زیادی DNA اگزوژن را حمل کنند و بیان ژن قوی و پایدار را ارائه دهند. با این حال ، تولید بردارهای آدنوویروس در مقایسه با معرفهای ترانسفکشن غیر ویروسی پیچیده تر و زمان آن است.
بردارهای لنتی ویروس گزینه دیگری هستند. آنها می توانند DNA اگزوژن را در ژنوم سلول میزبان ادغام کنند و در نتیجه بیان ژن پایدار ایجاد شود. بردارهای لنتی ویروس برای مطالعات طولانی مدت در سلول های TET - 213 ، مانند تولید رده های سلولی پایدار مناسب هستند. با این حال ، آنها همچنین به دلیل خطرات احتمالی بیوازارد خود به کار خاصی نیاز دارند.

مقایسه معرفهای ترانسفکشن برای سلول های TET - 213

هنگام مقایسه معرفهای مختلف ترانسفکشن ، مهم است که عملکرد آنها را از نظر راندمان ترانسفکشن ، زنده ماندن سلول ، سهولت استفاده و هزینه در نظر بگیرید. معرفهای مبتنی بر لیپیدها مانند لیپوفکتامین 2000 و 3000 برای استفاده نسبتاً آسان هستند و با زنده ماندن سلول قابل قبول از راندمان ترانسفکشن بالایی برخوردار هستند. آنها برای هر دو آزمایش کوتاه مدت و بلند مدت مناسب هستند. معرفهای مبتنی بر پلیمر مانند PEI و JETPEI هزینه ای دارند و می توانند به راندمان ترانسفکشن خوبی برسند ، اما بهینه سازی سمیت مورد نیاز است. بردارهای مبتنی بر ویروسی ، تحویل ژن با بهره وری بالا و بیان پایدار را ارائه می دهند اما به تجهیزات تخصصی تر و اقدامات احتیاطی ایمنی نیاز دارند.

کاربردهای TET ترانسفکت شده - 213 سلول

پس از انتقال موفقیت آمیز ، می توان از سلول های TET - 213 در انواع برنامه ها استفاده کرد. به عنوان مثال ، در مطالعات عملکرد ژن ، از سلولهای ترانسفکت شده می توان برای بررسی نقش ژنهای خاص در رشد و عملکرد عصبی استفاده کرد. محققان با بیان بیش از حد یا پایین آمدن یک ژن خاص ، می توانند تغییرات در مورفولوژی سلولی ، انتشار انتقال دهنده عصبی و مسیرهای انتقال سیگنال را مشاهده کنند.
در کشف دارو ، سلولهای TET - 213 ترانسفکت شده می توانند به عنوان یک مدل غربالگری برای شناسایی عوامل درمانی بالقوه استفاده شوند. به عنوان مثال ، ژنهای مرتبط با بیماریهای عصبی می توانند به سلول ها منتقل شوند و سپس سلول ها را می توان با ترکیبات مختلف درمان کرد تا اثرات آنها را بر روی فنوتیپ های مرتبط با بیماری ارزیابی کند.
علاوه بر این ، سلولهای TET - 213 با ژنهایی که پروتئین های فلورسنت را رمزگذاری می کنند می توانند برای مطالعات تصویربرداری زنده و زنده استفاده شوند. این به محققان این امکان را می دهد تا فرآیندهای سلولی پویا را در زمان واقعی مشاهده کنند.

پپتیدهای مرتبط برای آزمایش های مرتبط

در برخی از آزمایشات مربوط به سلول های TET - 213 ترانسفکت شده ، ممکن است از پپتیدهای اضافی استفاده شود. به عنوان مثال ،سیکلو (RADFK)باماده P (9 - 11)وتبتا - آمیلوئید (1 - 40) ، انسانمی توان در مطالعات مربوط به سیگنالینگ عصبی ، تعامل پپتید - گیرنده و بیماریهای عصبی استفاده کرد. این پپتیدها می توانند به روشن شدن مکانیسم های اساسی عملکرد عصبی و رشد بیماری کمک کنند.

پایان

انتخاب معرف ترانسفکشن مناسب برای سلولهای TET - 213 برای تحویل موفق ژن و مطالعات آزمایشی متعاقب آن بسیار مهم است. معرفهای ترانسفکشن مبتنی بر لیپید ، پلیمری و مبتنی بر ویروسی هر یک مزایا و محدودیت های خاص خود را دارند. محققان هنگام انتخاب یک معرف ترانسفکشن ، باید نیازهای خاص آزمایشات خود ، مانند راندمان ترانسفکشن ، زنده ماندن سلول و نوع اسید نوکلئیک را با دقت در نظر بگیرند.
ما به عنوان تأمین کننده سلول TET - 213 ، ما متعهد به ارائه سلول های با کیفیت بالا و ارائه راهنمایی در مورد بهترین شیوه ها برای کشت سلولی و ترانسفکشن هستیم. اگر علاقه مند به خرید TET - 213 سلول برای تحقیق خود هستید یا در مورد معرفهای ترانسفکشن و آزمایش های مرتبط با آن سؤالی دارید ، لطفاً برای کسب اطلاعات بیشتر با ما تماس بگیرید و در مورد فرصت های بالقوه همکاری صحبت کنید.

منابع

1. Sambrook ، J. ، & Russell ، DW (2001). کلونینگ مولکولی: یک دفترچه آزمایشگاهی. مطبوعات آزمایشگاه بندر بهار سرد.
2. چن ، ج. ، و اوکاناما ، H. (1987). تحول بالا - کارآیی سلولهای پستانداران توسط DNA پلاسمید. زیست شناسی مولکولی و سلولی ، 7 (8) ، 2745 - 2752.
3. Amara ، F. ، Rehem ، A. ، & Galy ، A. (2016). مروری بر روشهای ترانسفکشن فعلی و سیستم های تحویل. مجله داروسازی و علوم زیستی ، 8 (3) ، 181 - 187.