سلام! به عنوان تامین کننده TRAP - 14، اغلب در مورد چگونگی سنتز این پپتید از من سوال می شود. بنابراین، فکر کردم که وقت بگذارم تا فرآیند سنتز را برای شما تجزیه کنم.
درک TRAP - 14
ابتدا اجازه دهید به طور خلاصه در مورد چیستی TRAP - 14 صحبت کنیم. TRAP مخفف Thrombin Receptor Activating Peptide است. TRAP - 14 یک پپتید خاص با زنجیره ای از 14 اسید آمینه است. نقش مهمی در فعال کردن گیرنده های ترومبین ایفا می کند که در فرآیند لخته شدن خون و سایر عملکردهای فیزیولوژیکی مهم هستند.
فرآیند سنتز
مرحله 1: انتخاب آمینو اسید
سنتز TRAP - 14 با انتخاب دقیق آمینو اسیدهای مناسب شروع می شود. ما باید اسیدهای آمینه با کیفیت بالا را انتخاب کنیم که خالص و عاری از هر گونه آلودگی باشند. هر آمینو اسید ویژگی های منحصر به فرد خود را دارد و به دست آوردن اسیدهای آمینه مناسب کلید سنتز یک پپتید TRAP 14 است. به عنوان مثال، ما باید اطمینان حاصل کنیم که گروه های محافظ زنجیره جانبی اسیدهای آمینه برای روش سنتزی که قرار است استفاده کنیم، مناسب هستند.
مرحله 2: سنتز پپتید فاز جامد (SPPS)
بیشتر اوقات، ما از سنتز پپتید فاز جامد برای ساختن TRAP - 14 استفاده می کنیم. این روش توسط رابرت بروس مریفیلد در سال 1963 توسعه داده شد، و این یک تغییر دهنده بازی در سنتز پپتید بوده است.
این فرآیند با اتصال اولین اسید آمینه به یک تکیه گاه جامد، معمولاً یک رزین، آغاز می شود. رزین یک پایه پایدار برای زنجیره پپتیدی در حال رشد فراهم می کند. هنگامی که اولین اسید آمینه متصل شد، میتوانیم شروع به اضافه کردن اسیدهای آمینه باقیمانده یکی یکی کنیم.
قبل از افزودن هر اسید آمینه جدید، باید آن را فعال کنیم. این شامل واکنش آن با یک معرف جفت کننده است. معرف کوپلینگ به تشکیل پیوند پپتیدی بین اسید آمینه جدید و زنجیره پپتیدی در حال رشد روی رزین کمک می کند. پس از واکنش کوپلینگ، ما باید هر گونه واکنش دهنده و فرآورده های جانبی واکنش نداده را بشوییم.
یکی از خوبیهای SPPS این است که خودکار کردن آن نسبتاً آسان است. ما می توانیم از سنتز کننده های پپتید برای کنترل افزودن اسیدهای آمینه، مراحل فعال سازی و مراحل شستشو استفاده کنیم. این نه تنها فرآیند سنتز را تسریع می کند، بلکه احتمال خطای انسانی را نیز کاهش می دهد.
مرحله 3: محافظت زدایی
بعد از اینکه تمام اسیدهای آمینه برای تشکیل زنجیره 14 آمینو اسیدی TRAP - 14 اضافه شد، باید گروه های محافظ را حذف کنیم. این گروههای محافظ برای جلوگیری از واکنشهای ناخواسته در طول فرآیند سنتز، زودتر اضافه شدند.
محافظت زدایی معمولاً با استفاده از یک اسید قوی مانند اسید تری فلورواستیک (TFA) انجام می شود. TFA می تواند پیوندهای بین گروه های محافظ و اسیدهای آمینه را بدون آسیب رساندن به زنجیره پپتیدی بشکند. با این حال، ما باید مراقب شرایط واکنش، مانند غلظت TFA و زمان واکنش باشیم تا از هرگونه واکنش جانبی جلوگیری کنیم.
مرحله 4: جدا شدن از رزین
هنگامی که محافظت کامل شد، باید پپتید TRAP - 14 را از رزین جدا کنیم. این نیز با استفاده از یک معرف برش مناسب انجام می شود. پس از جدا شدن، پپتید در محلول آزاد می شود و رزین را می توان با فیلتراسیون حذف کرد.
مرحله 5: تصفیه
پپتید خام TRAP - 14 که پس از برش به دست می آید باید خالص شود. چندین روش تصفیه وجود دارد که می توانیم استفاده کنیم، اما کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC) یکی از رایج ترین آنها است.
HPLC پپتید را از هر ناخالصی باقیمانده بر اساس خواص شیمیایی متفاوت آنها جدا می کند. ما می توانیم فاز متحرک و فاز ثابت ستون HPLC را برای دستیابی به بهترین جداسازی تنظیم کنیم. پس از خالص سازی، می توانیم یک پپتید TRAP - 14 بسیار خالص دریافت کنیم.
مرحله 6: شخصیت پردازی
در نهایت، ما باید پپتید TRAP - 14 سنتز شده را مشخص کنیم تا مطمئن شویم که ساختار و خواص مناسبی دارد. ما از تکنیک هایی مانند طیف سنجی جرمی برای تعیین وزن مولکولی پپتید استفاده می کنیم. اگر وزن مولکولی با مقدار مورد انتظار مطابقت داشته باشد، نشانه خوبی از موفقیت آمیز بودن سنتز است. همچنین میتوانیم از طیفسنجی تشدید مغناطیسی هستهای (NMR) برای تأیید توالی اسید آمینه و ساختار سه بعدی پپتید استفاده کنیم.
مقایسه با سایر پپتیدها
مقایسه فرآیند سنتز TRAP - 14 با سایر پپتیدها جالب است. به عنوان مثال،تله - 5یکی دیگر از پپتیدهای فعال کننده گیرنده ترومبین است، اما فقط 5 اسید آمینه دارد. سنتز TRAP - 5 به طور کلی سریعتر و ساده تر است زیرا اسیدهای آمینه کمتری برای اضافه کردن وجود دارد. با این حال، اصول اولیه SPPS همچنان اعمال می شود.
پپتید دیگر،DOTA - E - [c(RGDfK)2]، ساختار پیچیده تری دارد. حاوی یک پپتید حلقوی و یک عامل کیلیت (DOTA) است. سنتز این پپتید به مراحل اضافی برای تشکیل ساختار حلقوی و اتصال گروه DOTA نیاز دارد.
سکرتین (رت)یک هورمون پپتیدی است. سنتز آن نیز از اصول کلی سنتز پپتید پیروی می کند، اما توالی و الزامات فعالیت بیولوژیکی ممکن است به برخی تفاوت ها در شرایط سنتز و روش های خالص سازی منجر شود.
چرا تله خود را انتخاب کنید - 14
به عنوان یک تامین کننده، ما به TRAP - 14 با کیفیت بالا افتخار می کنیم. ما در هر مرحله از فرآیند سنتز اقدامات کنترل کیفیت دقیقی داریم. تیم کارشناسان ما سال ها تجربه در سنتز پپتید دارند، بنابراین می توانید مطمئن باشید که TRAP - 14 که از ما دریافت می کنید خالص و کاربردی است.
ما همچنین خدمات سنتز سفارشی را ارائه می دهیم. اگر به یک نسخه اصلاح شده TRAP - 14 یا یک پپتید با یک توالی خاص نیاز دارید، ما می توانیم با شما همکاری کنیم تا نیازهای شما را برآورده کنیم.
برای خرید با ما تماس بگیرید
اگر علاقه مند به خرید TRAP - 14 هستید یا در مورد محصولات ما سوالی دارید، در تماس با ما دریغ نکنید. ما همیشه خوشحالیم که به شما در رفع نیازهای پپتید کمک کنیم. چه محققی در آزمایشگاه یا شرکتی باشید که روی توسعه داروی جدید کار میکند، ما میتوانیم TRAP - 14 با کیفیت بالا را برای شما فراهم کنیم.
مراجع
- مریفیلد، RB (1963). سنتز پپتید فاز جامد. I. سنتز یک تتراپپتید. مجله انجمن شیمی آمریکا، 85 (14)، 2149 - 2154.
- فیلدز، GB، و نوبل، RL (1990). سنتز پپتید فاز جامد با استفاده از اسیدهای آمینه 9 فلورنیل متوکسی کربونیل. مجله بین المللی تحقیقات پپتید و پروتئین، 35 (2)، 161 - 214.