مواد دارویی فعال پپتید (API) به دلیل ویژگی بالای ، سمیت کم و پتانسیل برای درمان طیف گسترده ای از بیماری ها ، در صنعت داروسازی مورد توجه قابل توجهی قرار گرفته است. ما به عنوان یک تأمین کننده پیشرو APIS پپتید ، ما متعهد هستیم که از طریق روشهای پیشرفته سنتز محصولات پپتید با کیفیت بالا را تهیه کنیم. در این وبلاگ ، ما به روش های مختلفی که API های پپتید سنتز می شوند ، می پردازیم.
سنتز پپتید فاز جامد (SPPS)
سنتز پپتید فاز جامد یکی از پرکاربردترین روشها برای سنتز API های پپتید است. این رویکرد توسط رابرت بروس مریفیلد در سال 1963 پیشگام شد ، که در سنتز پپتید متحول شد و در سال 1984 جایزه نوبل شیمی را به دست آورد.
اصل اساسی SPP ها شامل اتصال پایانه C - اولین اسید آمینه به یک پشتیبانی جامد نامحلول ، مانند رزین است. این رزین یک بستر پایدار برای واکنشهای شیمیایی بعدی فراهم می کند. گروه آمینه اسید آمینه متصل با یک گروه محافظ مناسب ، به طور معمول FMOC (9 - فلورنیل متیلوکسی کربنیل) یا BOC (TERT - Butyloxycarbonyl) محافظت می شود.
هنگامی که اولین اسید آمینه به رزین وصل شد ، گروه محافظ در گروه آمینه آن برداشته می شود و گروه آمینه واکنشی را در معرض نمایش قرار می دهد. اسید آمینه بعدی ، همچنین با گروه آمینه محافظت شده ، سپس با استفاده از یک معرف اتصال به گروه آمینه آزاد اسید آمینه قبلی متصل می شود. معمولاً معرفهای اتصال دهنده شامل DIC (n ، n ' - diisopropylcarbodiimide) ، hbtu (o - بنزوتریازول - n ، n ، n' ، n ' - تترامتیل - uronium - hexafluoro - فسفات) و hatu (O- (7 - Azabenzotrizol -yl) - yl) tetramethyluronium hexafluorophosphate).
پس از هر مرحله اتصال ، گروه های آمینه بدون واکنش برای جلوگیری از تشکیل توالی حذف قرار می گیرند. این کار معمولاً با استفاده از آنهیدرید استیک انجام می شود. چرخه محرومیت ، اتصال و پوشش برای هر اسید آمینه در دنباله پپتید مورد نظر تکرار می شود.
هنگامی که کل دنباله پپتید روی رزین مونتاژ شد ، پپتید با استفاده از یک کوکتل شکاف از رزین جدا می شود. این کوکتل همچنین هر گروه محافظت کننده از زنجیره ای را که در اسیدهای آمینه در طول سنتز وجود داشتند ، حذف می کند. سپس پپتید شکاف با روش هایی مانند کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC) خالص می شود.
راه حل - سنتز پپتید فاز
راه حل - سنتز پپتید فاز یک روش قدیمی تر است اما هنوز هم در موقعیت های خاص از مزایای آن برخوردار است. در این روش ، تمام واکنش ها در محلول صورت می گیرد و پپتید به یک پشتیبانی جامد وصل نمی شود.
سنتز با محافظت از گروههای آمینه و کربوکسیل اسیدهای آمینه فردی شروع می شود. مشابه SPP ها ، گروه های محافظ مانند FMOC یا BOC برای گروه آمینه استفاده می شوند و از گروه های استر برای محافظت از گروه کربوکسیل استفاده می شود.
اولین قدم ، جفت شدن دو اسید آمینه محافظت شده برای تشکیل دیپپتید است. این با استفاده از یک معرف اتصال ، مشابه موارد مورد استفاده در SPP ها حاصل می شود. پس از تشکیل دیپپتید ، گروه های محافظ در یک انتهای دیپپتید برداشته می شوند و سپس با اسید آمینه محافظت شده دیگر یا دیپپتید همراه می شوند تا یک پپتید طولانی تر تشکیل دهند.
این روند مکرر است - به صورت مرحله تا زمانی که توالی پپتید مورد نظر بدست آید. یکی از چالش های سنتز فاز محلول ، تصفیه پپتیدهای میانی در هر مرحله است ، زیرا مخلوط واکنش حاوی مختلف توسط محصولات و مواد اولیه بدون واکنش است. تصفیه به طور معمول با استخراج ، تبلور یا کروماتوگرافی انجام می شود.
بستن شیمیایی
بستن شیمیایی یک روش قدرتمند برای سنتز پپتیدهای بزرگ یا پروتئین هایی است که با استفاده از SPP های سنتی یا سنتز فاز محلول دشوار است. یکی از روشهای شناخته شده چربی شیمیایی ، بستن شیمیایی بومی (NCL) است.
در NCL ، یک پپتید با یک تیوستر ترمینال C - با پپتید دیگر با باقیمانده سیستئین ترمینال N - واکنش نشان می دهد. واکنش در شرایط آبی خفیف رخ می دهد و منجر به تشکیل پیوند پپتید بومی بین دو پپتید می شود.
این فرآیند شامل اولین سنتز دو یا چند بخش پپتید با استفاده از SPPS یا سنتز فاز محلول است. یک بخش با یک thioester ترمینال C - ترمینال و بخش دیگر با سیستئین ترمینال N - ترمینال تهیه شده است. این بخش ها سپس در یک بافر مناسب مخلوط می شوند و واکنش بستن صورت می گیرد. در صورت لزوم ، در صورت لزوم ، باقیمانده سیستئین می تواند بیشتر اصلاح یا به عنوان دسته برای واکنشهای شیمیایی اضافی مورد استفاده قرار گیرد.
ترکیب همگرا
سنتز همگرا یک استراتژی است که مزایای SPPS و بستن شیمیایی را با هم ترکیب می کند. به جای سنتز کل دنباله پپتید به روشی خطی ، پپتید به بخش های کوچکتر تقسیم می شود ، که به طور جداگانه با استفاده از SPP ها سنتز می شوند.
این بخش ها سپس با استفاده از روش های بستن شیمیایی به هم پیوسته می شوند. این رویکرد تعداد مراحل اتصال مورد نیاز برای سنتز پپتیدهای بزرگ را کاهش می دهد ، که می تواند عملکرد کلی و خلوص محصول نهایی را بهبود بخشد. به عنوان مثال ، یک پپتید طولانی را می توان به سه یا چهار بخش تقسیم کرد که هر یک حاوی 10 - 20 اسید آمینه است. این بخش ها بر روی رزین سنتز می شوند ، شکاف داده می شوند و سپس به صورت همگرا لیگ می شوند.
نمونه هایی از API های پپتید ما
ما طیف گسترده ای از API های پپتید را ارائه می دهیم ، از جملهC20 - OTB - GLU (OBBU) - ATBI10 - ATBU) عکس ها - O Oie - OANA - OEباC20 (OTBU) - GLU (OTBU)وتpalmitoyl - glu (OSU) - otbuبشر این پپتیدها با استفاده از روشهای پیشرفته ای که در بالا توضیح داده شد ، سنتز می شوند و از خلوص و کیفیت بالا اطمینان می دهند.
کنترل کیفیت در سنتز API پپتید
کنترل کیفیت در سنتز API های پپتید از اهمیت بالایی برخوردار است. ما یک سیستم کنترل کیفیت جامع داریم تا اطمینان حاصل کنیم که محصولات ما بالاترین استانداردها را رعایت می کنند.
پس از سنتز ، پپتید با تکنیک های مختلف از جمله HPLC ، طیف سنجی جرمی (MS) و رزونانس مغناطیسی هسته ای (NMR) مورد تجزیه و تحلیل قرار می گیرد. HPLC برای تعیین خلوص پپتید استفاده می شود ، در حالی که MS برای تأیید وزن مولکولی پپتید استفاده می شود. NMR می تواند اطلاعاتی در مورد ساختار و ترکیب پپتید ارائه دهد.
ما همچنین مطالعات پایداری را انجام می دهیم تا اطمینان حاصل شود که API های پپتید در شرایط مختلف ذخیره سازی پایدار باقی می مانند. این شامل آزمایش پپتید در دماهای مختلف ، مقادیر pH و در حضور مواد تحریک کننده مختلف است.
پایان
سنتز API های پپتید یک فرآیند پیچیده و چند مرحله ای است که به تکنیک های پیشرفته و کنترل کیفیت دقیق نیاز دارد. ما به عنوان یک تأمین کننده APIS پپتید ، ما دائما در حال بررسی روش ها و فناوری های جدید برای بهبود کارآیی و کیفیت سنتز خود هستیم. این که آیا از طریق سنتز پپتید فاز جامد ، سنتز فاز محلول ، بستن شیمیایی یا سنتز همگرا است ، ما متعهد هستیم محصولات پپتید با کیفیت بالا را در اختیار مشتریان خود قرار دهیم.
اگر علاقه مند به خرید API های پپتید ما هستید یا در مورد سنتز پپتید سؤالی دارید ، لطفاً برای بحث در مورد تهیه با ما تماس بگیرید. ما مشتاقانه منتظر همکاری با شما هستیم تا نیازهای API پپتید خود را برآورده کنیم.
منابع
- Fields ، GB ، & Noble ، RL (1990). سنتز پپتید فاز با استفاده از اسیدهای آمینه فلوئورنیل متیوکسی کربنیل. مجله بین المللی تحقیقات پپتید و پروتئین ، 35 (2) ، 161 - 214.
- Dawson ، PE ، Muir ، TW ، Clark - Lewis ، I. ، & Kent ، SBH (1994). سنتز پروتئین ها توسط بستن شیمیایی بومی. علوم ، 266 (5186) ، 776 - 779.
- Chan ، WC ، & White ، PD (2000). سنتز پپتید فاز جامد FMOC: یک رویکرد عملی. انتشارات دانشگاه آکسفورد.